液氮保藏法，亦稱超低溫保藏法。主要利用微生物在低于-130°C的低溫下新陳代謝趨于停止的原理，在液氮中(-196°C的超低溫下)有效地進行菌種保藏的方法。此法操作簡便、高效，保藏期一般可達到15年以上，是目前公認的菌種長期保藏技術之一，并且適用于各類微生物菌種的保藏。但是，采用液氮保藏，需購置超低溫液氮設備，且液氮消耗量大，費用高。液氮低溫保藏的保護劑，一般選擇甘油、二甲基亞砜、糊精、血清蛋白、聚乙烯氮戊環(huán)、吐溫80等，最常用的是甘油(10%?20%)，不同微生物應選擇不同的保護劑，保護劑的濃度應控制在不造成微生物死亡為宜。

操作方法

把微生物細胞混懸于含保護劑(20%甘油，10%DMSO等)的液體培養(yǎng)基中(也可把含菌瓊脂塊直接浸入含保護劑的培養(yǎng)液中)，分裝入耐低溫的安瓿瓶中后，作緩慢預冷，然后移至液氮罐中的液相(-196℃)或氣相(-156℃)作長期超低溫保藏。

操作原則

"慢凍快溶"。

原理

利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。

0.5mol/L左右的甘油或二甲亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)可透入細胞，并通過降低強烈的脫水作用而保護細胞。

優(yōu)點

保藏期長(15年以上)，且適合保藏各類微生物，尤其適宜于保存難以用冷凍干燥保藏法保藏的微生物，如支原體、衣原體、不產孢子的真菌、微藻和原生動物等。

缺點

需要液氮罐等特殊設備，且管理費用高、操作較復雜、發(fā)放不便等。

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威德杰WDJ小型一體液氮發(fā)生器主要性能指標

制冷機采用擁有自主知識產權的多元環(huán)保制冷工質;

冷箱采用特有的二次發(fā)泡技術,達到良好的保溫效果;

制冷系統(tǒng)均采用經(jīng)典可靠的商用壓縮機,部件易獲得;

與傳統(tǒng)斯特林和GM機相比,制冷機無需定期維護、高可靠性、使用周期長。

液化機具有一鍵開機-鍵關機功能,當液氮罐內的液氮低于設定液位時設備自動啟動;設備具有遠程監(jiān)控功能,當設備故障或液氮低于報警位時可遠程告警通知用戶。